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BCM-2502
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Envoyée par : Thierry Vincent
Répondue par : Jean-Sébastien Parent
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2006-11-01
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Question
#401
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Dans une site de clonage multiple sur un plasmide à quoi ca sert d'avoir 6 codons d'affilé qui code pour un hexapeptide d'histidine?
J'ai lu que ca sert à contrôler l'expression d'une protéine de fusion. Est-ce que ca veut dire qu'un hexapeptide d'histidine contrôle l'expression d'une protéine codé par un insert? |
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Réponse
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Salut Thierry. Les six acides aminés histidines rajoutés à la fin d’une protéine sont communément appelés un «His-Tag». Le principe est le suivant, lorsque l’on place un gène dans le site de polyclonage du vecteur, il est placé en phase avec les six codons His. La protéine synthétisée aura donc un ajout d’un His-Tag. Ce faisant, on rajoute une caractéristique à notre protéine, c’est-à-dire une grande avidité pour les ions métalliques, particulièrement le nickel. Cette caractéristique permet alors de purifier facilement la protéine grâce à une colonne de nickel. Les différents «tag» que l’on adjoint à une protéine peuvent également servir à la détection à l’aide d’anticorps élevés contre les «tag». Ce sont là des techniques de biologie moléculaire courante et la His-Tag est prisée à cause de sa petite taille et de sa grande spécificité. Ces éléments ne sont en aucun cas liés à l’expression du gène ou même la production de la protéine.
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