|
BCM-2501
|
Envoyée par : fabiola barthélémy
Répondue par : Martin Audet
|
2006-04-11
|
Question
#351
|
1. Pourriez-vous définir en termes plus claire la notion de Bmax = densité de récepteurs (nombre de moles de ligands (je me demandais si ce n’était ligands liés au récepteur) / mg de protéines (je me demandais si c’était protéines totales dans la cellule ou récepteurs protéiques d’intérêt)?
2. Diapos 10 (première partie)- j’ai essayé de comprendre avec le Alberts le principe de l’équation de Scatchard, pourriez-vous l’expliquer (si possible une démonstration mathématique)
3. Diapo 14 (1e partie)-Que représente de manière pratique la production de -100% d’AMPc dans la courbe agoniste inverse, et dans le contexte in vivo, qu’elle est la différence avec une production nulle d’AMPc en présence de l’antagoniste (par exemple : pour un diabétique où on désir que le glucose demeure à l’intérieur des cellules, on prescrit un antagoniste ou un agoniste inverse)
|
|
Réponse
|
Bonjour,
Le Bmax est la densité de ligand radiomarqué liée de manière spécifique aux récepteurs lorsque que tous les sites de liaisons sont occupés (à saturation). Si on assume que chaque récepteur a un site de liaison alors le Bmax est strictement égale à la densité de récepteur présent dans l’échantillon. On peut l’exprimer en quantité de ligand lié par mg de protéine total dans l’échantillon ou bien le plus souvent en nombre de récepteur par mg de protéine total (si l’on connaît le nombre de site de liaison au récepteur).
Une courbe de saturation est décrite par la fonction (1) :
B = signal de liaison spécifique
Bmax = Densité maximale de récepteur
F = concentration de ligand libre
Kd = constante d’affinité
Maintenant, observe attentivement la courbe de scatchard de la diapositive numéro 10 des notes du Dr.Heveker. À l’axe y on a B/F et à l’axe des x on a B. La courbe de scatchard est donc un réarrangement simple de la fonction de saturation (1) permettant de décrire la relation entre le ratio B/F et la variable B. Voici le réarangement (voir les équations plus bas)
On a donc une fonction dont la pente est égale à -1/Kd (le facteur qui multiplie la variable) et dont l’ordonnée à l’origine (si B = 0 B/F = ?) est égale à Bmax/Kd. De plus, si l’ordonnée (B/F) est égale à zéro, B = Bmax. Ainsi, la courbe de scatchard (7) est une fonction linéaire (y = mx + b) extraite d’une hyperbole (1) qui permet la simplification de l’analyse des résultats et la détermination rapide des paramètres du système étudié comme le Kd et le Bmax.
3- Un récepteur couplé au protéines Gs va produire un peu d’AMPc sans stimulation. On appelle cet état la production basal ou constitutive d’AMPc. Un agoniste provoque l’augmentation de production d’AMPc au dessus du niveau basal. Un antagoniste n’influence pas la production d’AMPc car il ne fait que bloquer le site de liaison au récepteur. Un agoniste inverse provoque une diminution de production d’AMPc en dessous du niveau basal. Pour ce qui et du diabète, une des cibles pharmacologique qui couple la protéine Gs est le récepteur du glucagon. Une des approches thérapeutiques est l’utilisation d’antagonistes.Voici trois références qui pourront d’en dire plus :
J. Biol Chem. 2006 Feb27 Pan CQ et al.
Mol. Endocrinol. 1998 Jan;12(1) :78-86 Hjorth SA et al.
Nutr Metab Cardiovasc Dis. 2006 Mar;16 Suppl 1:S28-34 Fanelli CG et al.
Martin
|
| Informations |
Question consultée 9090 fois. | 4784 votes, Moyenne 3/5.0 | À vous de voter => min      max |
|
Étudiants
